帶大家來(lái)了解一下高效液相色譜儀。我將從原理、色譜特點(diǎn)以及應用等3個(gè)方面介紹一下高效液相色譜儀。
高效液相色譜儀(HPLC)是應用高效液相色譜原理，主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器設備。它由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。HPLC廣泛應用于生命科學(xué)、食品科學(xué)、藥物研究以及環(huán)境研究中。儲液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入檢測系統，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱（固定相）內，由于樣本溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，在兩相中作相對運動(dòng)時(shí)，經(jīng)過(guò)反復多次的“吸附-解吸”的分配過(guò)程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內流出，通過(guò)檢測器時(shí)，樣本濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式輸出檢測結果。
高效液相色譜儀特點(diǎn)
1．高壓：液相色譜法以液體為流動(dòng)相（稱(chēng)為載液），液體流經(jīng)色譜柱，受到阻力較大，為了迅速地通過(guò)色譜柱，必須對載液施加高壓。一般可達150～350*105Pa 。
2．高速：流動(dòng)相在柱內的流速較經(jīng)典色譜快得多，一般可達1～10ml/min。高效液相色譜法所需的分析時(shí)間較之經(jīng)典液相色譜法少得多，一般少于1h 。
3．高效：近年來(lái)研究出許多新型固定相，使分離效率大大提高。
4．高靈敏度：高效液相色譜已廣泛采用高靈敏度的檢測器，進(jìn)一步提高了分析的靈敏度。如熒光檢測器靈敏度可達10-11g。另外，用樣量小，一般幾個(gè)微升。
5．適應范圍寬：氣相色譜法與高效液相色譜法的比較：氣相色譜法雖具有分離能力好，靈敏度高，分析速度快，操作方便等優(yōu)點(diǎn)，但是受技術(shù)條件的限制，沸點(diǎn)太高的物質(zhì)或熱穩定性差的物質(zhì)都難于應用氣相色譜法進(jìn)行分析。
