高效液相色譜儀(HPLC)是應用高效液相色譜原理，主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器設備。它由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。廣泛應用于生命科學(xué)、食品科學(xué)、藥物研究以及環(huán)境研究中。

 

工作時(shí)儲液器中的流動(dòng)相被高壓泵壓入檢測系統，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入色譜系統，被流動(dòng)相載入色譜柱（固定相）內，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，在兩相中作相對運動(dòng)時(shí)，經(jīng)過(guò)反復多次的吸附-解吸的分配過(guò)程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內流出，在其通過(guò)檢測器時(shí)，被轉換成信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式輸出。

 

高效液相色譜儀的柱壓是否穩定與色譜圖峰形好壞、分離效果、保留時(shí)間等有著(zhù)密切關(guān)聯(lián)。以下是常見(jiàn)的幾種柱壓?jiǎn)?wèn)題及解決方法：

 

(1)柱壓升高

①色譜柱被堵塞，解決方法更換新的色譜柱；

②系統壓力零點(diǎn)飄移，解決方法:調節壓力傳感器的零點(diǎn)；

③阻尼器堵塞，解決方法:拆下后進(jìn)行超聲波清洗或更換新的阻尼器；

④進(jìn)樣器、管路或連接口堵塞，解決方法:參見(jiàn)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行清洗。

 

(2)柱壓降低:

①無(wú)流動(dòng)相流出，解決方法:檢查貯液瓶中有無(wú)流動(dòng)相、沉子是否浸沒(méi)在流動(dòng)相中、泵是否運行；

②系統存在漏液，解決方法:檢查各部件的連接點(diǎn)，進(jìn)行再次固定；

③參比閥未關(guān)閉，解決方法將流速降低后關(guān)閉參比閥。

 

(3)柱壓不穩

①系統管路中存在氣泡，解決方法重新進(jìn)行排氣操作；

②沉子表面的小孔被堵，解決方法:將沉子取下后進(jìn)行超聲波清洗。