液相色譜法(HPLC)是目前應用廣泛的分離、分析、純化有機化合物(包括能通過(guò)化學(xué)反應轉變?yōu)橛袡C化合物的無(wú)機物)的有效方法之一。 在已知的有機化合物中,約有80%能用液相色譜法分離、分析,而且由于此法條件溫和,不破壞樣品,因此特別適合高沸點(diǎn)、難氣化揮發(fā)、熱穩定性差的有機化合物和生命物質(zhì)。
液相色譜儀是在經(jīng)典液相柱色譜儀的基礎上,引入了氣相色譜儀的理論,采用了高壓輸液泵、固定相、梯度洗脫技術(shù)和高靈敏度檢測器,具有高壓、高速、、高靈敏度、高選擇性和應用范圍廣等特點(diǎn)。
液相色譜儀的操作步驟:
1、打開(kāi)電腦
2、打開(kāi)主機、預熱
3、進(jìn)入儀器工作站,聯(lián)機并設定儀器使用方法及儀器參數
4、啟動(dòng)泵的動(dòng)力系統預處理(排氣等)
5、檢查是否漏夜、柱壓是否正常
6、設置儀器方法,包括儀器的使用條件等
7、激活操作方法,等待儀器平衡、基線(xiàn)平直
8、儀器出現“Ready”后可進(jìn)行樣品分析
9、操作測試結束后,清理所有實(shí)驗材料,做好清潔衛生
10、記錄儀器使用日志,并與管理員辦理交接手續
液相色譜儀使用注意事項:
1、液相色譜的流動(dòng)相應采用色譜純溶劑,以滿(mǎn)足儀器要求、避免損壞色譜柱;
2、嚴禁使用有污染的水等沖洗色譜柱,避免將互不相溶的溶劑一同進(jìn)入泵內;
3、流動(dòng)相需經(jīng)過(guò)濾、除氣后方可使用;
4、待分析的樣品必須*溶解澄清、過(guò)濾,以避免堵塞、損壞色譜柱;
5、分析完成后,須注意及時(shí)清洗色譜柱和檢測器的比色池。